应用全骨髓贴壁法获取高纯度大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究

目的 探讨体外获取高纯度大鼠骨髓间充质干细胞的方法.方法 应用全骨髓贴壁法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,进行传代培养,倒置显微镜下观察细胞形态并测定其生长曲线,流式细胞术检测细胞周期,免疫细胞化学法鉴定细胞表面标志CD34、CD44及CD45.结果 获取的大鼠骨髓间充质干细胞形态呈均一成纤维细胞样,并呈集落样生长.细胞生长曲线示,在传代后的第4-5天细胞开始明显增殖,进入指数增生期.细胞周期显示81.49%P3代细胞为G0/C1期,经免疫细胞化学染色结果显示CD44阳性,CD34、CD45阴性.结论 体外应用全骨髓贴壁法可以分离培养出高纯度的大鼠骨髓间充质干细胞,而且此法简单易行、经济.     

乙型肝炎病毒DNA不同抽提方法的比较及在其隐匿性感染中的应用

目的对血清中HBV DNA不同抽提方法进行比较,选择较优方法进行隐匿性HBV感染的检测。方法分别用直接煮沸法、辛酸钠法、蛋白酶K消化-酚-氯仿法、PEG8000法、辛酸钠-酚-氯仿法、碱裂解法、柱抽提法,抽提血清中HBV DNA,比较各方法对PCR检测HBV DNA得率的影响,并在得率较高的方法中进行灵敏度、重复性的比较。采用辛酸钠法、辛酸钠-酚-氯仿法、碱裂解法处理单一抗-HBc阳性血清并进行套式PCR。结果辛酸钠-酚-氯仿法HBV DNA得率最高,辛酸钠法、碱裂解法、直接煮沸法、柱抽提法得率次之,蛋白酶K消化-酚-氯仿法及PEG8000法得率较低。辛酸钠-酚-氯仿法有较高的灵敏度,较好的重复性。在单一抗-HBc阳性血清中,辛酸钠-酚-氯仿法、辛酸钠法和碱裂解法的HBV DNA检测阳性率分别为35%、25%和20%。结论核酸抽提方法的不同直接影响HBV的PCR检测灵敏度。辛酸钠-酚-氯仿法在隐匿性HBV DNA检测中有较好的效果。     

山西省和陕西省部分贫困县基层临床肝病医师培训项目的效果分析

目的 了解山西省和陕西省贫困县基层临床肝病医师（学员）的肝病相关知识现状,评估培训效果,为后续干预、培训工作提供参考。方法 选取山西省和陕西省贫困县的县级医院及上一级市级医院临床肝病医师90名作为研究对象,对其进行肝病相关知识培训,分别在培训前、培训后、培训后5个月各做1次知识题测试;采用方差分析、χ²检验,统计知识得分和正确率。结果 培训前学员的知识得分为（42.96±14.02）分,培训后重测的知识得分为（62.86±13.28）分,培训后5个月的知识得分为（59.03±17.92）分,差异均有统计学意义（P<0.05）。理论培训后,学员对各项知识的了解程度均有所提升,提升的幅度与培训前相比差异有统计学意义（P<0.05）,培训后5个月,提升幅度的差异仍有统计学意义。结论 山西省和陕西省的贫困县基层临床肝病医师参加培训后,肝病相关知识均有所提高,并且知识可保持近半年时间。     

载脂蛋白E与遗传性病和感染性疾病的关系

载脂蛋白E(apoliproteinE ,apoE)是血浆中重要的载脂蛋白之一 ,最早是在 1973年由Shore等从正常人的极低密度脂蛋白 (VLDL)中首先发现的。apoE主要在肝脏合成、分泌和代谢 ,参与脂质的运输、储存及排泄 ,有修复组织、抑制血小板聚集、免疫调节等作用。近年来发现apoE及其基因的     

乙型肝炎病毒基本核心启动子和前C基因序列分析

目的 研究乙型肝炎病毒(HBV)基本核心启动子(BCP)区及前C(Pre C)区基因的变异情况,并且分析其发生频率、分布规律及其与临床病情的关系.方法 应用套式PCR扩增nt1660-1935的HBV DNA片段及PCR产物直接测序的方法检测BCP区及Pre-C区基因的变异情况.结果 130例乙型肝炎患者标本中,BCP区nt1762/nt1764发生双突变者75例(57.69%),Pre-C区nt1896发生突变者20例(15.38%),并且这两种突变在重型肝炎组(75.00%)及肝硬化组(72.22%)所占比例均明显高于慢性肝炎组(52.56%);此外,在BCP区及Pre-C/C区还发现了一些突变频率较高的其他突变位点(如nt1753,nt1766,nt1846,nt1899,nt1915),其中nt1753突变仅发生于有nt1762/1764双突变的患者,与重型肝炎及肝硬化的发生有一定关系;在BCP区有4处核苷酸突变共存者10例,其中重型肝炎组(12.50%)及肝硬化组(13.88%)所占比例明显高于慢性肝炎组(5.12%).结论 HBV BCP区nt1762/nt1764双突变和Pre-C区nt1896突变与肝炎的活动、重型化及肝硬化的发生有关;BCP区其他位点的突变共存对肝炎病情的进展也有重要影响.     

人类白细胞抗原-DRB1基因多态性与阿德福韦酯抗病毒近期疗效的相关性

目的 探讨人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)-DRB1等位基因多态性与阿德福韦酯(adefovir,ADV)抗病毒疗效相关性.方法 以服用阿德福韦酯抗病毒治疗的山西地区家族性慢性乙型肝炎患者56例为研究对象,采用聚合酶链反应-序列特异性寡核苷酸探针技术(polymerase chain reaction sequence specific oligonucleotide probe,PCR-SSOP)结合荧光磁珠流式检测技术,进行HLA-DRB1等位基因的检测,分析比较治疗有效组与无效组HLA-DRB1各等位基因频率的差异.结果 阿德福韦酯治疗有效组HLA-DRB1*04等位基因频率明显高于无效组(18.3% vs 3.9%,χ2=5.699,P＜0.05,OR=5.612);而有效组HLA-DRB1*07等位基因频率明显低于无效组(1.7% vs 15.4%,χ2=5.359,P＜0.05,OR=10.727),其他各等位基因频率在两组间差异无显著性.结论 HLA-DRB1*04可能是阿德福韦酯治疗有效的预测指标,而HLA-DRB1*07可能是阿德福韦酯治疗无效的预测指标.